Le concept

La production d’anticorps monoclonaux grâce à EZ-Flask (Flacon “Easy” en Américain) est grandement facilitée par le fait qu’il n’y est aucun repiquage nécessaire. Une grande concentration est possible dans son volume de 1 litre.

Ses avantages majeurs sont l’augmentation significative de la production d’anticorps monoclonaux comparé à d’autres flacons de culture disponibles sur le marché, dû à sa technologie de membrane à échange de gaz. À travers cet article nous décortiquerons les avantages phares d’EZ-Flask et de sa technologie.

Ez-Flask for in vitro monoclonal antibody production

Une oxygénation en continu sans repiquage

Il existe plusieurs manières traditionnelles de cultiver des cellules non-adhérentes ou des hybridomes: flacons rouleurs, flacons T, bioréacteurs à agitation, … Cependant toutes ces méthodes sont contraignantes d’une façon ou d’une autre. Nous savons par exemple qu’une bonne oxygénation des cellules est critique si l’on veut qu’une culture prolifère et viabilise ses produits sécrétés.

En effet, le problème majeur des flacons-T est le fait que seul une petite quantité de milieu de culture peut être ajoutée. Si il y a trop de milieu l’oxygénation par diffusion ne pourra pas se faire et les cellules mourront.

EZ-Flask contourne ce problème car le flacon possède une membrane à échange de gaz à sa base. Cette membrane est faite en silicone semi-perméable permettant ainsi un échange des gaz efficace et en continu. Comme les cellules couvrent la base du flacon elles seront directement oxygénés et pourront proliférer rapidement. Le dioxyde de carbone sera aussi facilement éliminé.

Ainsi le flacon EZ-Flask pourra être rempli dans sa totalité, soit avec 1 litre de milieu de culture, sans affecter la croissance des cellules. Au contraire, le fait qu’il y est autant de milieu disponible permettra aux cellules de proliférer continuellement et sereinement tout en ayant une abondance de nutriments à leur disposition.

Cela veut dire que aucun repiquage n’est nécessaire et le flacon EZ-Flask peut alors rester continuellement dans l’incubateur pendant des durées allant de 15 à 30 jours.

 

EZ-Flask Technologie d'échange de gaz

 

Réduction significative des effets de cisaillement

Nous savons que certaines techniques traditionnelles de culture cellulaire: flacons rouleurs, bioréacteurs à agitation, flacons-T, peuvent perturber et parfois endommager les cellules lors des phases de repiquage et d’agitation.

Sachant que EZ-Flask peut être laissé dans l’incubateur sans repiquage, nous évitons ainsi tout effet de cisaillement au niveau des cellules pendant toute la durée de leur prolifération. De plus, aucune agitation du flacon est nécessaire pour l’oxygénation des cellules grâce à la membrane d’échange de gaz de EZ-Flask.

Par conséquent la production d’anticorps monoclonaux d’hybridomes ou tout autres cellules non-adhérentes (CHO, HEK 293, …) est augmentée et sa qualité en est améliorée.

Augmenter votre production d’anticorps monoclonaux d’hybridomes ou d’autres cellules en suspensions avec EZ-Flask

Un seul flacon EZ-Flask permet d’obtenir la même productivité que 20 flacons T175. Les quantités d’anticorps monoclonaux en mg varient grandement en fonction de l’hybridome utilisé. Par exemple certains clients ont obtenu 3 mg d’anticorps avec EZ-Flask après 30 jours de culture venant d’un hybridome très compliqué à travailler. Ils étaient très satisfait du rendement. D’autres clients ont pu obtenir des quantités beaucoup plus importantes en 30 jours allant jusqu’à 180 mg d’anticorps obtenu par un hybridome plus facile à travailler. EZ-Flask ne rendra pas un mauvais hybridome meilleur mais permettra cependant d’en optimiser sa productivité au maximum.

De plus, le design compact et ergonomique du flacon EZ-Flask permet à l’utilisateur d’empiler facilement et efficacement plusieurs flacons dans l’incubateur ce qui permet d’optimiser l’espace et ainsi d’augmenter votre production d’anticorps monoclonaux.

” I tested together with my colleagues the EZ flask. As you can deduce from the data we feel very satisfied with your product EZ Flask, especially comparing your product with a similar in vitro static culture device. We will be using this system for R&D. For larger scale productions of IgG we will switch to Hollow Fiber

Cristina a obtenu jusqu’à 180mg d’anticorps monoclonaux purifiés avec la protéine A, dans un volume total de 1L de milieu et pour un coût matériel total de 200 euros. Les données sont dans le document technique ci-joint.

Cristina Scozzesi, Dia.Pro. Srl

” We have grown a hybridoma to obtain mAb. And it effectively significantly increases yield. Growing it in the same conditions of culture media and supplements.”

Isabel à obtenu jusqu’à 117mg d’anticorps monoclonaux après 15 jours de culture dans un volume totale de 1L.

Isabel Garcia, EUROFINS
technical brief

Découvrez les G-Rex Plates: une plaque de culture fonctionnant grâce à la même technologie d’échange de gaz que EZ-Flask qui se compose soit de 6 ou 24 puits de culture. C’est un système parfait pour la recherche et le développement à petite échelle. Vous obtiendrez toujours de plus hauts rendements qu’avec des flacons-T.

G-Rex plates

EZ-Flask et G-Rex sont des produits manufacturés par Wilson Wolf (USA) et distribués par KDBIO en Europe, en Suisse, au Royaume-Uni et en Norvège.

 
 

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